Массовая вспышка инфекции E. coli типа О104 в Европе заразила более 1 800 человек и вызвала потенциально смертельное осложнение, известное как гемолитико-уремический синдром, у более чем 500 человек.

Вспышка преодолела границы, по крайней мере, 13 стран и убила около 20 человек.

Пока органы здравоохранения пытаются выявить очаги вспышки в продуктах питания, внимание международного сообщества сосредоточено на сложных траекториях, по которым сельскохозяйственная продукция следует в эпоху глобальной торговли.

На один из аспектов эпидемии, однако, обратили мало внимания: этот аномальный штамм устойчив ко многим видам антибиотиков .

Среди всех срочных вопросов, поднятых вспышкой эпидемии, эта устойчивость штамма заставляет бить во все колокола и побуждает к серьезному рассмотрению вопроса о сдерживании чрезмерного применения антибиотиков , вызванного инфекцией.

О резистентности штамма О104 вскользь упоминали, но скорее как о любопытном моменте, который отличает эту инфекцию, чем как о проблеме.

Это имеет большое значение, поскольку самый безопасный путь лечения инфекций, вызванных бактерией E. coli, также производит токсины , как и кишечная палочка.

Необходимо воздержаться от использования антибиотиков , поскольку, когда лекарственные препараты убивают бактерии, они производят токсины, которые могут вызвать худшие симптомы болезни.

Таким образом, поскольку антибиотики не могут быть использованы против инфекции E. coli, вопрос о том, будут ли они работать, стал предметом академического интереса – одного из многих, обсуждаемых в интернете исследователями-добровольцами, которые делают быстрые анализы по всему миру.

Даже если это не имеет отношения к нынешним жертвам, стоит обратить внимание на значительную устойчивость к антибиотику этой инфекции E. coli.

Отчасти потому, что Шига-токсин, который вырабатывает кишечная инфекция такого штамма, как O104:H4 и родственного ему намного более известного штамма O157:H7, обладает редкостной устойчивостью.

Хотя бы поэтому необходима разработка новых методов защиты от этого страшного врага.

Однако более важно то, что, по крайней мере, за десятилетие в Европе возникли новые резистентные факторы, которые повышают устойчивость штамма O104.

Их перемещение в штамм демонстрирует, что резистентные факторы могут неограниченно хаотически перемещаться среди организмов, как только они появляются.

И это должно подчеркнуть, как важно замедлить развитие устойчивости к антибиотику за счет сдерживания ненадлежащего использования антибиотиков в повседневной медицине и на сельскохозяйственных фермах.

По данным немецкого Института Роберта Коха, штамм O104 устойчив к более чем десяти антибиотикам восьми классов:
пенициллину
стрептомицину
тетрациклину
хинолону (налидиксовая кислота)
триметоприму/сульфаметоксазолу
трем поколениям сефалоспорина
амоксил/клавулановой кислоте
пиперациллин/сульбактам
пиперациллин/тазобактам.

Устойчивость к такому количеству препаратов свидетельствует о том, что в штамме O104 находится резистентная бактерия ESBL.

Действительно, согласно анализу Института Коха, штамм содержит два гена, которые вызывают эту резистентность - TEM-1 и CTX-M-15.

Это свойство бросает в дрожь врачей с 1990-х годов, когда штаммы резистентной бактерии ESBL и бактерии Klebsiella вызвали серьезные внутрибольничные инфекции, которые охватили Европу.

Поскольку изначально они поражали пациентов в отделениях интенсивной терапии, эти штаммы не вызвали большой тревоги в мире.

Но примерно в 2001 году эти резистентные факторы проникли в повседневную жизнь и вызвали панику.

Вследствие генетического перемещения, которое все время осуществляла бактерия, гены резистентности переместились в некоторые штаммы бактерии E. coli, попав не столько в пищу, создавая токсины, сколько распространившись вообще, вызывая инфекции мочевых путей и другие обычно нетяжелые заболевания.

Внезапно больницы в Бермингеме и Шропшире начали фиксировать значительные вспышки инфекции, вызванные бактериями E. coli и ESBL, а врачи, работающие в больницах, начали сообщать друг другу о молодых женщинах, которые страдают от рецидивных инфекций мочевого пузыря, которые могли вызвать новые препараты .

Это было явлением не только 2000-х годов.

В марте 2010 года университетская больница Северного Стаффордшира зафиксировала вспышку, вызванную бактериями ESBL и Klebsiella, вследствие которой пациент умер.

Откуда происходят эти резистентные факторы?

Развитие резистентности является неизбежным биологическим процессом; таким образом бактерия защищается от смертельных компонентов, не зависимо от того, выработаны ли эти компоненты другой бактерией или искусственно произведены в исследовательской лаборатории.

Однако чрезмерное применение антибиотиков ускоряет процесс и делает его результаты непредсказуемыми.

Это чрезмерное применение происходит в любое время, когда кто-либо принимает антибиотики при болезнях, для лечения которых они не подходят, таких как простуда или ушные инфекции .

Еще чаще это происходит, когда малые дозы антибиотиков добавляются на тонну продукции в агропромышленном комплексе, без какого-либо наблюдения и исследования возникающих вирусов .

Исследования в Испании и США свидетельствуют о связях между агрокультурным комплексом и возникновением бактерии ESBL: они выявили резистентную бактерию в мясе кур, продающихся в супермаркете.

Даже если исследователи определят овощи, которые могли послужить причиной возникновения вспышки инфекции, они никогда не смогут сказать, как резистентная бактерия попала в продукцию.

В 2006 году США пережили общенациональную вспышку кишечной инфекции штамма O157, бактериями которой был заражен свежий шпинат.

И хотя подозрение исследователей пало на навоз домашнего скота или диких свиней вблизи ферм, они так и не смогли выявить причины заражения.

Но мы уже знаем, почему возникает устойчивость к антибиотикам в этой вспышке и, учитывая беспорядочную склонность бактерии к перемещению генетического материала, мы знаем, что штамм O104 резистентен, поскольку содержит подобную бактерию, и может передавать ее другим типам инфекции.

Государствам и органам здравоохранения давно пора сделать все от них зависящее, чтобы замедлить развитие резистентности лекарственных препаратов, сдерживая чрезмерное применение антибиотиков по всему миру .

Кишечная палочка – заболевания, пути передачи, симптомы кишечных инфекций и заболеваний мочеполового тракта (у женщины, у мужчины, у ребенка), методы лечения. Выявление бактерии в анализе мочи и в мазке из влагалища

Спасибо

Сайт предоставляет справочную информацию исключительно для ознакомления. Диагностику и лечение заболеваний нужно проходить под наблюдением специалиста. У всех препаратов имеются противопоказания. Консультация специалиста обязательна!

Краткая характеристика и разновидности кишечной палочки

Все разновидности кишечных палочек устойчивы к воздействиям факторов внешней среды, а потому могут в течение длительного времени сохраняться в жизнеспособном состоянии в воде, почве и фекальных массах. В то же время кишечные палочки погибают при кипячении и воздействии на них формалина , хлорной извести, фенола, сулемы, едкого натра и 1% раствора карболовой кислоты.

Бактерии быстро и хорошо размножаются в продуктах питания, особенно в молоке , а потому съедание зараженных и обсемененных кишечной палочкой блюд вызывает заражение с последующим развитием инфекционно-воспалительного заболевания.

Непатогенные разновидности кишечной палочки (эшерихии коли) входят в состав нормальной микрофлоры кишечника человека. Они появляются в кишечнике человека в первые дни после появления на свет в процессе его заселения нормальной микрофлорой, и сохраняются в течение всей жизни. В норме в содержимом толстого кишечника человека должно быть 10 6 -10 8 КОЕ/г кишечных палочек, а в каловых массах – 10 7 -10 8 КОЕ/г типичных кишечных палочек и не более 10 5 КОЕ/г лактозонегативных ее разновидностей. Кроме того, в норме и в содержимом толстой кишки, и в фекалиях должны отсутствовать гемолитические кишечные палочки. Если содержание бактерий выше или ниже указанных норм, то это свидетельствует о дисбактериозе .

Хотя доля кишечной палочки среди всех остальных представителей микрофлоры составляет только 1%, роль этих бактерий очень важна для нормальной работы пищеварительного тракта. Во-первых, эшерихии коли, заселяя кишечник, конкурируют с другими патогенными и условно-патогенными микроорганизмами, препятствуя их поселению в просвете толстой кишки, тем самым профилактируя различные инфекционно-воспалительные кишечные заболевания.

Во-вторых, кишечные палочки утилизируют кислород, который губителен и вреден для лактобацилл и бифидобактерий, составляющих остальную, большую часть кишечной микрофлоры. То есть благодаря кишечной палочке обеспечивается выживание лактобацилл и бифидобактерий, которые, в свою очередь, жизненно необходимы для функционирования кишечника и переваривания пищи. Ведь если не будет лактобацилл и бифидобактерий, пища окажется не переваренной полностью, начнет гнить и бродить в просвете кишечника, что приведет к тяжелым заболеваниям, истощению и, в конечном итоге, к смерти.

В-третьих, кишечные палочки в результате своей жизнедеятельности вырабатывают жизненно важные для организма вещества, такие, как витамины группы В (В 1 , В 2 , В 3 , В 5 , В 6 , В 9 , В 12), витамин К и биотин, а также уксусную, муравьиную, молочную и янтарную кислоту . Выработка витаминов позволяет обеспечить большую часть суточной потребности организма в них, вследствие чего все клетки и органы работают нормально и максимально эффективно. Уксусная, муравьиная, молочная и янтарная кислоты, с одной стороны, обеспечивают нужную для жизни бифидобактерий и лактобацилл кислотность среды, а с другой стороны, утилизируются в процессах обмена веществ. Кроме того, кишечные палочки участвуют в обмене холестерина , билирубина, холина, желчных кислот и способствуют усвоению железа и кальция .

К сожалению, среди разновидностей кишечной палочки имеются и патогенные, которые при попадании в кишечник вызывают инфекционно-воспалительные заболевания.

Кишечная палочка под микроскопом - видео

Патогенные разновидности бактерии

• Энтеропатогенные кишечные палочки (ЭПКП или ЕТЕС);
• Энтеротоксигенные кишечные палочки (ЭТКП);
• Энтероинвазивные кишечные палочки (ЭИКП или EIEC);
• Энтерогеморрагические (гемолитические) кишечные палочки (ЭГКП или ЕНЕС).

"Диарея путешественников" проявляется водянистым жидким стулом и наиболее часто развивается у людей, оказавшихся в теплое время года в развивающихся странах, где отсутствуют нормальные санитарные нормы хранения и приготовления пищи. Данная кишечная инфекция через несколько дней проходит самостоятельно и не требует лечения, поскольку иммунная система организма человека успешно уничтожает патогенную кишечную палочку.

Энтерогеморрагическая (гемолитическая, гемолизирующая) кишечная палочка вызывает геморрагический колит у детей и взрослых или гемолитико-уремический синдром (ГУС). Оба заболевания требуют лечения.

Кишечная палочка: особенности генома, причины вспышек кишечных заболеваний, как бактерии приобретают патогенные свойства - видео

Какие заболевания вызывает кишечная палочка?

Патогенные разновидности кишечной палочки при попадании в желудочно-кишечный тракт вызывают кишечные инфекции и гемолитико-уремический синдром у детей и взрослых. Кишечные инфекции могут протекать по типу геморрагического колита, энтерита , пищевого отравления или "диареи путешественников".

При этом энтеропатогенные кишечные палочки (ЭПКП) вызывают преимущественно энтероколиты (кишечные инфекции) у детей первого года жизни, причем инфекция, как правило, возникает в форме вспышки в дошкольных учреждениях, родильных домах и больницах. Патогенные штаммы кишечной палочки передаются детям контактно-бытовым путем через руки родивших женщин и медицинского персонала, а также с нестерильным инструментом (шпателями, термометрами и др.). Также энтеропатогенные разновидности кишечной палочки могут вызывать пищевое отравление у детей первого года жизни, находящихся на искусственном вскармливании , если попадают в молочные смеси, приготовленные с несоблюдением санитарным норм и правил гигиены .

Энтероинвазивные кишечные палочки (ЭИКП) вызывают кишечные инфекции у детей старше года и взрослых, которые протекают по типу дизентерии. Передача инфекции, как правило, происходит через загрязненную воду и продукты питания. Наиболее часто такие дизентерийноподобные инфекции бывают в теплое время года, когда увеличивается частота употребления или случайного заглатывания грязной некипяченой воды и продуктов питания, приготовленных и хранившихся с нарушением санитарных норм.

Вызывают кишечные инфекции у детей старше 2 лет и взрослых, протекающие по типу холеры . Как правило, данные инфекции широко распространены в странах с жарким климатом и плохими санитарными условиями жизни населения. В странах бывшего СССР такие инфекции обычно завозные, их "привозят" люди, возвращающиеся из отпуска или рабочих командировок в жаркие местности. Обычно заражение данными кишечными инфекциями происходит через употребление загрязненной воды и пищи.

Энтеропатогенные, энтероинвазивные и энтеротоксигенные кишечные палочки при тяжелом течении вызываемых ими кишечных инфекций могут приводить к развитию осложнений, таких, как отит , цистит, пиелонефрит , менингит и сепсис. Как правило, такие осложнения возникают у детей первого года жизни или у пожилых людей, иммунная система которых недостаточно эффективно уничтожает патогенные микробы.

Энтерогеморрагические (гемолитические) кишечные палочки вызывают тяжелые кишечные инфекции у детей старше года и взрослых, которые протекают по типу геморрагического колита. При тяжелом течении геморрагического колита возможно развитие осложнения – гемолитико-уремического синдрома (ГУС), который характеризуется триадой – гемолитической анемией , почечной недостаточностью и критическим снижением количества тромбоцитов в крови. ГУС, как правило, развивается через 7 – 10 дней после перенесенной кишечной инфекции.

Кроме того, гемолитическая кишечная палочка может приводить к развитию невритов и заболеваний почек у детей и взрослых в случаях, если попадет в мочевыводящие пути или в кровоток. Инфицирование происходит через воду и пищу.

Помимо кишечных инфекций, кишечные палочки могут вызывать заболевания мочевой и половой систем у мужчин женщин при условии, что они попадут в соответствующие органы. Причем заболевания органов мочеполовой системы у мужчин и женщин могут вызывать не только патогенные, но и непатогенные разновидности кишечной палочки. Как правило, попадание кишечных палочек в половые и мочевыделительные органы происходит при несоблюдении правил личной гигиены, ношении тесного белья или анальных половых актах.

При попадании кишечных палочек в мочевыводящие пути как мужчин, так и женщин, развиваются воспалительные заболевания уретры , мочевого пузыря и почек , такие, как уретриты , циститы и пиелонефриты.

Попадание кишечной палочки в уретру мужчины приводит к развитию воспалительных заболеваний не только органов мочевыводящей, но и половой системы, поскольку по уретре микробы могут подниматься как в почки, так и в яички и предстательную железу. Соответственно, инфицирование уретры мужчины кишечными палочками в будущем может привести к хроническим простатитам , орхитам (воспаление яичек) и эпидидимитам (воспаление придатков яичек).

Попадание кишечной палочки во влагалище женщин является причиной воспалительных заболеваний внутренних половых органов. Причем, в первую очередь, кишечная палочка вызывает кольпит или вульвовагинит . В будущем, если кишечная палочка не будет уничтожена и удалена из влагалища, бактерии могут подниматься в матку , откуда по маточным трубам добираться и до яичников . В случае, если кишечные палочки попадут в матку, у женщины разовьется эндометрит , если в яичники – аднексит . Если же из маточных труб кишечные палочки попадут в брюшную полость в большом количестве, то это может привести к развитию перитонита .

Заболевания мочевыделительных и половых органов, обусловленные кишечной палочкой, могут длиться годами и трудно поддаваться терапии.

Пути передачи инфекции

Контактно-бытовой путь распространения кишечных палочек встречается реже и играет наибольшее значение для развития вспышек эшерихиозов в коллективах, например, в больницах, родильных домах, детских садах, школах, в семьях и т.д. При контактно-бытовом пути кишечные палочки могут передаваться от матери к новорожденному ребенку при прохождении последнего по родовым путям, загрязненным бактериями. Кроме того, бактерии могут переноситься на различные предметы (например, посуду, шпатели и т.д.) немытыми руками, использование которых влечет за собой инфицирование детей и взрослых.

Кишечная палочка у женщин

Значимыми для женщин являются инфекции мочеполовых органов , вызываемые также кишечными палочками, поскольку они протекают длительно, мучительно и с трудом поддаются терапии. То есть помимо кишечных инфекций, патологические и непатологические кишечные палочки могут вызывать у женщин тяжелые, длительно текущие хронические заболевания мочевыводящих и половых органов, а также заражение крови или менингиты при условии, что попадут в уретру, влагалище или в кровоток. Проникать в мочеполовые органы кишечные палочки могут из фекалий, в которых они содержатся в норме в достаточно большом количестве.

В уретру и влагалище кишечные палочки могут попадать следующими путями:

• Несоблюдение гигиены (женщина не подмывается регулярно, на коже промежности, ануса и половых органов скапливаются остатки фекалий после испражнений и т.д.);
• Ношение слишком тесного нижнего белья (в таком случае кожа промежности потеет и частички фекалий, оставшиеся на коже анального отверстия после дефекации, перемещаются ко входу во влагалище, в конечном итоге попадая в него);
• Неправильная техника подмывания (женщина подмывает сначала область анального отверстия, и после этого той же грязной рукой моет наружные половые органы);
• Специфическая техника половых актов, при которых происходит проникновение сначала в прямую кишку, а затем во влагалище (в этом случае на половом члене или сексуальных игрушках после проникновения в прямую кишку остаются частицы фекалий с кишечными палочками, которые и заносятся во влагалище);
• Обычный вагинальный половой акт с семяизвержением во влагалище с мужчиной, страдающим хроническим простатитом, орхитом или эпидидимитом, вызванными кишечной палочкой (в этом случае со спермой во влагалище женщины попадают кишечные палочки, носителем которых является ее половой партнер).

Воспалительные заболевания мочеполовых органов у женщин, спровоцированные кишечной палочкой, протекают длительно, склонны к хронизации и трудно поддаются лечению. Часто в организме протекает подострый воспалительный процесс, при котором отсутствуют четкие и заметные симптомы, вследствие чего женщина считает себя здоровой, хотя на самом деле является носительницей хронической инфекции. При таком подостром, стертом течении инфекции любое малейшее переохлаждение организма, стресс или иное резкое воздействие, приводящее к снижению иммунитета , станет толчком для перехода воспаления в активную и заметную форму. Именно носительством кишечной палочки объясняются хронические рецидивирующие циститы, пиелонефриты, кольпиты и эндометриты, обостряющиеся у женщин при малейшей простуде и не проходящие в течение долгих лет, несмотря на проводимую терапию.

Кишечная палочка у мужчин

А вот воспалительные заболевания мочеполовых органов , вызываемые кишечными палочками, играют гораздо большее значение в жизни мужчины, поскольку отрицательно сказываются на качестве жизни и являются причиной прогрессирующего ухудшения сексуальной и мочевыделительной функции. К сожалению, эти заболевания практически всегда являются хроническими, вялотекущими и очень трудно поддающимися терапии.

Воспалительные заболевания мочеполовых органов у мужчин кишечная палочка вызывает, если ей удается проникнуть в уретру (мочеиспускательный канал) пениса мужчины. Как правило, это происходит при анальном сексе без презерватива или вагинальном половом сношении с женщиной, влагалище которой обсеменено кишечными палочками.

После проникновения в уретру кишечная палочка провоцирует острый уретрит, который без лечения стихает в течение нескольких дней, но это происходит не потому что имеет место самоизлечение, а потому что инфекция переходит в хроническую форму и просто уменьшается выраженность симптоматики. То есть если острый уретрит, спровоцированный кишечной палочкой у мужчины, не вылечить, то инфекция перейдет в хроническую форму, а бактерия не просто останется в мочеиспускательном канале, а попадет в другие органы половой и мочевыделительной систем.

Необходимо понимать, что кишечную палочку невозможно удалить из уретры без лечения только регулярным мочеиспусканием, поскольку бактерия способна плотно прикрепляться к слизистой оболочке и не смываться потоком струи мочи. Со временем кишечные палочки из уретры поднимаются в вышележащие органы мужчины, такие, как мочевой пузырь, почки, предстательная железа, яички и придаток яичка, и вызывают в них хронический воспалительный процесс.

У мужчин кишечная палочка из уретры чаще проникает в половые органы, а не в мочевыделительные. Вследствие этого они гораздо реже, чем женщины, страдают циститами и пиелонефритами, спровоцированными кишечными палочками. Но мужчины очень часто страдают хроническими, длительно текущими и трудно поддающимися терапии простатитами, орхитами и эпидидимитами, которые также обусловлены тем, что в эти органы проникла кишечная палочка из уретры и периодически вызывает обострения. Достаточно сказать, что не менее 2/3 хронических простатитов у мужчин старше 35 лет обусловлены кишечной палочкой.

При наличии кишечной палочки в половых органах мужчины она так же, как и у женщин, будет активизироваться после малейшего эпизода переохлаждения или стресса, вызывая обострение простатита, орхита или эпидидимита. Такие воспалительные заболевания трудно поддаются терапии, и мужчина является их постоянным носителем, испытывая эпизодические мучительные обострения, которые упорно не проходят, несмотря на проводимую терапию.

Мужчина, ставший носителем хронической коли-инфекции половых органов, также является источником инфицирования и причиной частых циститов, пиелонефритов и кольпитов у своих половых партнерш. Дело в том, что при хроническом простатите, спровоцированном кишечной палочкой, последняя всегда попадает в сперму вместе с другими компонентами, вырабатываемыми предстательной железой. А в результате эякуляции такой инфицированной спермы во влагалище женщины происходит внесение кишечных палочек в ее половые пути. Далее кишечные палочки попадают в уретру или остаются во влагалище и вызывают, соответственно, цистит или кольпит. Причем эпизоды цистита или кольпита появляются практически после каждого полового сношения с партнером-мужчиной, сперма которого обсеменена кишечными палочками.

Статистика прошлых 30 – 40 лет свидетельствует о том, что 90 – 95% всех дефлорационных циститов, возникающих после первого в жизни девушки полового акта, вызваны кишечной палочкой. Это означает, что девственная девушка, вступая в первый половой контакт , заражается кишечной палочкой из спермы мужчины, который является ее носителем, в результате чего у нее развивается цистит, поскольку мочевой пузырь – это орган, куда бактерии попасть наиболее просто.

Кишечная палочка при беременности

Появление бактерии не означает, что женщина обязательно больна , но свидетельствует о том, что ее половые пути или мочевыводящая система обсеменена кишечными палочками, способными спровоцировать воспалительный процесс в любой момент. Поэтому даже при отсутствии симптомов заболевания врачи-гинекологи , ведущие беременность, назначают антибиотики для уничтожения бактерии. Ведь если кишечная палочка останется в моче, то рано или поздно это приведет к появлению у беременной женщины пиелонефрита или цистита. Если же кишечная палочка останется во влагалище, то это может привести к кольпиту, который, как известно, способен спровоцировать преждевременное излитие околоплодных вод. Кроме того, наличие кишечной палочки во влагалище перед родами представляет собой опасность для плода, поскольку ребенок может инфицироваться микробом во время прохождения по родовым путям матери. А такое инфицирование младенца может привести к развитию тяжелых заболеваний, таких, как сепсис, менингит, отит или кишечная инфекция, которые для новорожденного смертельно опасны.

Таким образом, очевидно, что обнаружение кишечной палочки в мазке из влагалища или в моче у беременной женщины требует обязательного лечения, даже если отсутствуют какие-либо симптомы воспалительного процесса в почках, мочевом пузыре, уретре или влагалище. При беременности для уничтожения кишечной палочки можно применять следующие антибиотики:

• Амоксиклав – можно применять в течение всей беременности;
• Цефотаксим – можно применять только с 27-ой недели беременности и до родов;
• Цефепим – можно применять только с 13-ой недели беременности и до родов;
• Цефтриаксон – можно применять только с 13-ой недели беременности и до родов;
• Фурагин – можно применять до 38-ой недели беременности, а с 38 и до родов – нельзя;
• Все антибиотики группы пенициллина .

Кишечная палочка у грудничка

Однако при обнаружении гемолитической кишечной палочки у грудничка не стоит спешить начинать лечение антибиотиками. Чтобы понять, нужно ли лечить малыша, следует объективно оценить его состояние. Так, если ребенок нормально прибавляет вес, развивается , хорошо кушает и не страдает от водянистого стула желтого цвета, выходящего из ануса ребенка буквально струей, то лечить малыша не нужно, поскольку терапия необходима только при наличии симптоматики, а не цифр в анализах. Если же ребенок теряет или не прибавляет вес, страдает от водянистого желтого, зловонного стула, вырывающегося струей, то это свидетельствует о кишечной инфекции, и в таком случае обнаруженную в анализах кишечную палочку нужно лечить.

Лактозонегативная кишечная палочка в фекалиях грудничка вполне может присутствовать, поскольку она является компонентом нормальной микрофлоры, и в норме может составлять до 5% от общего количества всех эшерихий коли, имеющихся в кишечнике. Поэтому обнаружение лактозонегативной кишечной палочки в кале грудничка неопасно, даже если ее количество превышает нормы, указываемые лабораторией , при условии, что ребенок нормально набирает вес и развивается. Соответственно, лечить лактозонегативную кишечную палочку, обнаруженную в анализах грудничка, не нужно, если он растет и развивается. Если же малыш не набирает или теряет вес , то лечить лактозонегативную кишечную палочку нужно.

Симптомы инфекции

А кишечные инфекции, вызываемые патогенными разновидностями эшерихий коли, могут протекать по-разному, поэтому мы опишем их симптоматику подробно. Причем в данном разделе опишем симптоматику, которая возникает у взрослых людей и детей старше трех лет, поскольку именно с этого возраста кишечные инфекции у малышей протекают так же, как и у взрослых. Отдельно, в следующих разделах опишем симптоматику кишечных инфекций, вызванных патогенными разновидностями эшерихии коли у детей младше 3 лет, поскольку они протекают не так, как у взрослых.

Итак, кольпит , спровоцированный кишечной палочкой, протекает вполне типично – у женщины появляются обильные дурно пахнущие выделения из влагалища, возникают боли при половом акте и неприятное ощущение при мочеиспускании.

Цистит и у мужчин, и у женщин также протекает типично – появляются боли и рези при попытках помочиться и возникают частые позывы на мочеиспускание . При походе в туалет выделяется небольшое количество мочи, иногда с примесями крови .

Пиелонефрит чаще возникает у женщин, и протекает с болями в области почек и неприятными ощущениями во время мочеиспускания.

Уретрит и у мужчин, и у женщин также протекает типично – появляются зуд в мочеиспускательном канале, кожа вокруг него краснеет, а во время мочеиспускания чувствуется резкая боль и жжение .

Простатит у мужчин характеризуется болями в области простаты, затруднением мочеиспускания и ухудшением половой функции.

Кишечные инфекции, вызванные различными разновидностями патогенных кишечных палочек, протекают с разными симптомами , поэтому рассмотрим их по-отдельности.

Итак, кишечные инфекции, вызванные энтеропатогенными кишечными палочками , у взрослых и детей старше 3 лет протекают по типу сальмонеллеза . То есть заболевание начинается остро, появляется тошнота , рвота, боли в животе, умеренно или незначительно повышается температура тела . Стул становится жидким, водянистым и обильным, причем больной ходит в туалет по 2 – 6 раз в сутки. При дефекации испражнения буквально брызжут. Инфекция в среднем продолжается в течение 3 – 6 дней, после чего наступает выздоровление.

Энтеротоксигенные кишечные палочки вызывают кишечные инфекции, называемые "диареей путешественников" , и протекающие по типу сальмонеллеза или легкой формы холеры. У человека сначала появляются признаки интоксикации (температура, головная боль , общая слабость и вялость), выраженные умеренно, и к ним в течение короткого промежутка времени присоединяются боли в животе в области желудка и пупка, появляется тошнота, рвота и обильный жидкий стул. Испражнения водянистые, без примеси крови и слизи, обильные, выходящие из кишечника струей. Если заражение произошло в странах с тропическим климатом, то у человека может фиксироваться лихорадка, озноб , боли в мышцах и суставах . Кишечная инфекция в среднем продолжается 1 – 5 дней, после чего наступает выздоровление.

Энтероинвазивные кишечные палочки провоцируют кишечные инфекции, по течению сходные с дизентерией. У человека умеренно повышается температура тела, появляется головная боль и слабость, пропадает аппетит , развиваются сильные боли в левой нижней части живота , которые сопровождаются обильным водянистым стулом с примесью крови . В отличие от дизентерии, стул обильный, а не скудный, со слизью и кровью. Инфекция длится 7 – 10 дней, после чего наступает выздоровление.

Вызывают кишечные инфекции, протекающие по типу геморрагического колита и встречающиеся преимущественно у детей. Инфекция начинается с умеренного повышения температуры тела и интоксикации (головная боль, слабость, потеря аппетита), после чего присоединяется тошнота, рвота и водянистый стул. При тяжелом течении на 3 – 4 день заболевания развиваются боли в животе, стул остается жидким, но бывает значительно чаще, и в испражнениях появляются прожилки крови. Иногда стул полностью состоит из гноя и крови без фекальных масс. Как правило, инфекция продолжается в течение недели, после чего наступает самовыздоровление. Но при тяжелом течении на 7 – 10 день после прекращения поноса может развиться гемолитико-уремический синдром.

Гемолитико-уремический синдром (ГУС) проявляется анемией, количество тромбоцитов снижается до критических цифр и появляется острая почечная недостаточность. ГУС является тяжелым осложнением кишечной инфекции, поскольку помимо анемии, почечной недостаточности и уменьшения количества тромбоцитов, у человека могут развиваться судороги ног и рук, ригидность мышц, парезы , сопор и кома .

Осложнения кишечных инфекций, вызываемых патогенными кишечными палочками у взрослых и детей старше 3 лет, возникают очень редко. Причем в большинстве случаев осложнения появляются при инфицировании энтерогеморрагической кишечной палочкой, и возникают примерно в 5% случаев. К осложнениям кишечных инфекций, провоцируемых кишечной палочкой, относят заболевания почек, геморрагическую пурпуру, судороги, парезы и ригидность мышц.

Кишечная палочка – симптомы у детей

Энтеропатогенная и энтеротоксигенная кишечные палочки являются причиной кишечных инфекций у детей раннего возраста, находящихся в коллективах, например, в больницах, родильных домах и т.д. Инфекция, вызываемая данными разновидностями кишечной палочки, характеризуется постепенным ухудшением состояния и нарастанием тяжести течения к 4 – 5 дню. У младенца сначала умеренно повышается (не выше 37,5 o С) или остается нормальной температура тела, затем появляются частые срыгивания и рвота. Стул становится частым , фекалии желтого цвета с примесями слизи или частичек непереваренной пищи. С каждым новым испражнением стул становится все более жидким, в нем увеличивается количество воды. Фекалии могут выливаться струей с сильным напором. Ребенок беспокойный, его живот вздут .

При легком течении инфекции рвота бывает по 1 – 2 раза в сутки, а стул – по 3 – 6 раз, а температура тела не повышается более 38 o С. При инфекции средней тяжести рвота чаще 3 раз в сутки, стул – до 12 раз в день, а температура может повышаться до 39 o С. При тяжелом течении заболевания стул бывает до 20 раз в сутки, а температура повышается до 38 – 39 o С.

Если ребенок, заболевший такой кишечной инфекцией, не получает достаточного количества жидкости для восполнения ее потерь с поносом, то у него в качестве осложнения может развиться ДВС-синдром (синдром диссеминированного внутрисосудистого свертывания) или гиповолемический шок с недостаточностью миокарда и парезом кишечника.

Кроме того, у детей с ослабленной иммунной системой кишечные палочки вследствие повреждений кишечной стенки могут проникать в кровоток и заноситься в другие органы, вызывая пиелонефрит, гнойный отит, менингит или сепсис.

Инфекция, вызванная энтеропатогенными и энтеротоксигенными кишечными палочками, наиболее тяжело протекает у детей 3 – 5 месяцев. Причем инфекция, спровоцированная энтеротоксигенными кишечными палочками у детей первого года жизни, как правило, проходит через 1 – 2 недели, после чего наступает полное выздоровление. А заболевание, обусловленное энтеропатогенными палочками, у детей первого года жизни протекает длительно, поскольку после выздоровления через 1 – 2 недели может рецидивировать. В общей сложности инфекция может длиться от 1 до 3 месяцев, когда периоды выздоровления чередуются с обострениями. У детей 1 – 3 лет инфекции, вызываемые и энтеропатогенной, и энтеротоксигенной кишечными палочками, длятся в течение 4 – 7 дней, после чего наступает самовыздоровление.

Инфекция, вызываемая энтероинвазивной кишечной палочкой , у детей младше 3 лет начинается с симптомов умеренной интоксикации (повышение температуры тела, головная боль, слабость, потеря аппетита), к которым присоединяется диарея. Фекалии жидкие, похожие по консистенции на сметану, содержат примеси слизи и иногда крови. Перед позывом на дефекацию появляются боли в животе. Заболевание обычно продолжается в течение 5 – 10 дней, после чего наступает самовыздоровление.

Энтерогеморрагические кишечные палочки вызывают кишечные инфекции, протекающие у детей любого возраста одинаково. В начале заболевания умеренно повышается температура тела и появляются симптомы интоксикации (головная боль, слабость, потеря аппетита), затем к ним присоединяются тошнота, рвота и жидкий стул. Фекалии водянистые, очень жидкие, брызжущие струей. Если инфекция протекает тяжело, то к 3 – 4 дню появляются боли в животе, учащается стул, и в фекалиях фиксируется примесь крови. В некоторых случаях из испражнений вовсе исчезают фекалии, и стул полностью состоит из крови и гноя.

При нетяжелом течении инфекция продолжается 7 – 10 дней, после чего наступает самовыздоровление. А при тяжелом течении примерно в 5% случаев развивается осложнение – гемолитико-уремический синдром (ГУС). ГУС проявляется почечной недостаточностью, анемией и резким уменьшением количества тромбоцитов в крови. Иногда при ГУСе также появляются судороги , ригидность и парезы мышц, а также развивается сопор или кома.

Что означает обнаружение кишечной палочки в различных анализах?

Кишечная палочка в моче или мочевом пузыре

Поэтому обнаружение кишечной палочки в моче или мочевом пузыре является сигналом для начала антибактериальной терапии антибиотиками с целью уничтожения патогенного микроба и устранения опасности развития острого воспалительного заболевания мочеполовых органов. Чтобы лечение было эффективным, нужно сначала сдать анализ мочи на бактериальный посев с целью выявления, к каким антибиотикам чувствительная кишечная палочка, обитающая в мочеполовом тракте данного конкретного человека. По результатам бактериологического посева мочи подбирают эффективный антибиотик и проводят курс терапии. Через 1 – 2 месяца вновь сдают мочу на бактериологический посев, и если по его результатам кишечная палочка не обнаруживается, то лечение считается успешным. Если же по результатам контрольного посева мочи кишечная палочка вновь обнаруживается, то вновь пропивается курс уже другого антибиотика, к которому также чувствительна бактерия.

Кишечная палочка в мазке (во влагалище)

Поэтому при обнаружении кишечной палочки в мазке из влагалища необходимо провести курс лечения антибиотиками с целью уничтожения данной бактерии в половых путях. Чтобы терапия была эффективной, необходимо сначала сдать отделяемое влагалища на бактериологический посев с целью выявления, к каким антибиотикам чувствительна кишечная палочка, оказавшаяся во влагалище конкретной женщины. Только после выявления чувствительности подбирается антибиотик, который будет эффективным, и начинается его прием. Через 1 – 2 месяца после лечения сдается контрольный бактериальный посев, и если по его результатам кишечная палочка отсутствует, то терапия прошла успешно. Если же в посеве снова обнаружилась кишечная палочка, то придется заново пройти курс терапии антибиотиком, но уже другим.

Кишечная палочка в море

Кишечная палочка в Черном море: в 2016 году количество заражений кишечной инфекцией бьет рекорды - видео

Анализ на кишечную палочку

• Бактериологический посев фекалий, мочи, рвотных масс, отделяемого половых органов. В ходе анализа биологические жидкости высеваются на питательную среду, состав которой приспособлен для роста именно кишечных палочек. Если на среде вырастают колонии кишечных палочек, то результат анализа считается положительным и означает, что в органе, из которого взяты биологические выделения, имеются кишечные палочки.
• Копрограмма или анализ кала на дисбактериоз. В ходе данных анализов выявляется, какие именно микроорганизмы содержатся в фекалиях и в каком количестве. Если по результатам копрограммы или анализа на дисбактериоз обнаруживаются патогенные кишечные палочки, то это означает, что у человека имеется кишечная инфекция. Если же по результатам анализов выявлены непатогенные кишечные палочки, но в ненормальном количестве, то это свидетельствует о дисбактериозе.

Норма кишечной палочки

Лечение

Наиболее эффективны для лечения инфекций мочеполовой системы, вызванных кишечной палочкой, следующие антибиотики:

• Цефотаксим;
• Цефтазидим;
• Цефепим;
• Имипенем;
• Меропенем;
• Левофлоксацин;

Итак, при кишечной инфекции детям и взрослым назначают щадящую диету , состоящую из слизистых супов, каш на воде, черствого белого хлеба, баранок, сухариков, отварных овощей, нежирной отварной рыбы или мяса. Из рациона исключают пряности, копченое, жирное, жареное, соленое, маринованное, консервы, молоко, наваристые супы, жирные сорта рыбы и мяса, свежие фрукты.

С момента появления поноса и рвоты и до их полного окончания обязательно питье регидратационных растворов, которые восполняют потери жидкости и солей. Пить нужно из расчета 300 – 500 мл на каждый эпизод поноса или рвоты. Регидратационные растворы готовятся либо из аптечных порошков (Регидрон , Трисоль, Глюкосолан и др.), либо из обычной соли, сахара, пищевой соды и чистой воды . Аптечные препараты просто разводятся чистой водой в количестве, указанном в инструкции. А домашний регидратационный раствор готовится следующим образом – в 1 литре чистой воды растворяется столовая ложка сахара и по одной чайной ложке соли и пищевой соды. Если регидратационные растворы по каким-либо причинам невозможно ни купить, ни приготовить самостоятельно, то нужно пить любые имеющиеся в доме напитки, такие, как чай с сахаром, компот, морс и т.д. Помните, что при поносе и рвоте лучше пить хотя бы что-то, чем ничего, поскольку нужно обязательно восполнять потери жидкости и солей.
Фуразолидон , который назначают и взрослым, и детям. Среди антибиотиков наиболее часто для лечения кишечной палочки назначают Ципрофлоксацин , Левофлоксацин или Амоксициллин . Антибиотики и Фуразолидон назначают на 5 – 7 дней.

Помимо антибиотиков, в настоящее время для уничтожения кишечной палочки с первых дней заболевания могут применяться бактериофаги – бактериофаг коли жидкий, интестибактериофаг, колипротейный бактериофаг, пиобактериофаг комбинированный жидкий, пиобактериофаг поливалентный комбинированный жидкий и др. Бактериофаги, в отличие от антибиотиков, действуют только на патогенную кишечную палочку и не уничтожают бифидо- и лактобактерии нормальной микрофлоры. Поэтому их можно принимать с первых дней заболевания.

После выздоровления от кишечной инфекции рекомендуется в течение 2 – 3 недель принимать пробиотики (Бификол, Бифидумбактерин

Изобретение относится к биотехнологии, касается получения продуцентов для пробиотических препаратов - бактерийных препаратов на основе живых культур микроорганизмов-симбионтов, используемых для профилактики и лечения дисбактериозов и других расстройств желудочно-кишечного тракта. В штамм Escherichia coli М17 - продуцент для пробиотического препарата колибактерин - введена неконьюгативная, немобилизуемая плазмида p Сolap, несущая гены продукции колицина Е1 и детерминант устойчивости к ампициллину в дозах до 150 мг/л. Полученный штамм лишен нежелательного адгезивного фенотипа инактивированием гена адгезина fimH пилей 1-го типа интеграцией гена устойчивости к канамицину - неомицину npt. Штамм E.coli М17 fim H::Kan/p Colap депонирован в ВКПМ под номером В-7448, Это позволяет создать пробиотический препарат со сниженной способностью к колонизации отличных от интестинальной ниш, с повышенной антагонистической активностью и резидентный на фоне антибиотикотерапии. Введенные в сконструированный штамм признаки стабильно сохраняются в популяции. Это облегчает получение стандартного препарата на основе штамма и гарантирует, что при приеме препарата пациентом без сопутствующей антибиотикотерапии не произойдет элиминация плазмиды. 4 ил., 1 табл.

Настоящее изобретение относится к биотехнологии и касается создания усовершенствованного штамма Escherichia coli, который может быть использован для получения пробиотиков - бактерийных препаратов на основе живых культур микроорганизмов-симбионтов. Пробиотики (другие названия препаратов данной группы: нормофлоры, эубиотики, микробиотики) являются эффективным средством для профилактики и лечения дисбактериоза кишечника. Дисбактериоз - это выраженное изменение в видовом и количественном соотношении микробов, которое проявляется в бурном развитии условно-патогенных микроорганизмов, в частности бактерий семейства кишечной группы (Enterobacteriaceae), и сопровождается различными болезненными проявлениями. Важной причиной дисбактериозов является применение антибиотиков и других противомикробных препаратов [Красноголовец В. Н. "Клиническое значение дисбактериоза кишечника, развившегося в результате применения антибиотиков". В кн. "Применение колибактерина для профилактики и лечения кишечных заболеваний и технология его производства". М., 1967, с. 223 - 243]. В настоящее время в России известны препараты пробиотиков "Колибактерин" и "Бификол", которые получают на основе штамма Escherichia coli М17, который, по-существу, является производным штамма Е.coli, выделенного А. Ниссле и используемого для получения препарата "Mutaflor" (Германия) [Перетц Л.Г. "Сухой колибактерин. Новые методы диагностики, лечения и профилактики кишечных заболеваний". В кн. "Тезисы докладов Пленуму Уч. мед. сов. МЗ РСФСР". М., 1961, с. 52-54]. Однако, в отличие от исходного штамма штамм Е. coli М17 утратил способность к синтезу колицина B и, следовательно, снизил свою антагонистическую активность в отношении бактерий кишечной группы [Шемчук Л.Ф. "Стандартизация колибактерина", автореф. канд.б.н., М., 1983, с. 16]. Другим недостатком штамма Е.coli М17 и его предшественника является наличие у них высокоадгезивного М н фенотипа фимбрий 1-го типа, необычного и нежелательного для кишечного штамма. Такой фенотип часто обнаруживается у выделяемых из макроорганизма штаммов при инфекции мочевыводящих путей и внутрибольничной пневмонии [Сокуренко Е.В., Чеснокова В.Л. "Способ модификации адгезивного фенотипа диких изолятов Е. coli в применении к штаммам - продуцентам препарата колибактерин". Бюллетень экспериментальной биологии и медицины, 1997, Том 124, N 9, с. 334 - 338]. Недостатком штамма E.coli М17 является также чувствительность его к антибиотикам. Поэтому препараты на его основе не могут быть эффективными на фоне приема антибиотиков. Между тем одновременное применение антибиотиков и пробиотиков может предотвращать развитие дисбактериоза и тем самым повышать эффективность терапевтических мероприятий, сокращать сроки лечения. Задачей изобретения является создание штамма Е.coli - производного E.coli М17, который позволяет устранить упомянутые выше недостатки известного штамма Е. coli М17, а именно: пониженная антагонистическая активность, нежелательный адгезивный фенотип, чувствительность к антибиотикам. Технический результат состоит в конструировании штамма с повышенной антагонистической активностью, сниженной способностью к колонизации отличных от первичной интестинальной ниш в макроорганизме и с резистентностью к умеренным дозам антибиотиков пенициллинового ряда. Указанная цель достигается тем, что с помощью генетических и генно-инженерных методов конструируют штамм Е.coli М17 fimH::kan/pColap, который продуцирует колицин E1, устойчив к умеренным концентрациям ампициллина (до 150 ЕД/мл) и содержит инактивированный ген fimH, кодирующий фимбриальный адгезин. Штамм Е.coli М17 fimH::kan/pColap депонирован во Всероссийской коллекции промышленных микроорганизмов под регистрационным номером В-7448. В основе патентуемой конструкции штамма лежат следующие положения. Нами впервые показано, что инактивирование гена адгезина fimH пилей 1-го типа в геноме Escherichia coli штамма М17 и введение в штамм Escherichia coli М17 неконьюгативной, немобилизуемой плазмиды pColap, несущей гены продукции колицина E1 и детерминант устойчивости к ампициллину в дозах до 150 мг/л позволяет создать пробиотический препарат со сниженной способностью к колонизации отличных от интестинальной ниш, с повышенной антагонистической активностью и резидентный на фоне антибиотикотерапии. Сущность патентуемого генно-инженерного решения поясняется чертежами, где: на фиг. 1 показана схема получения рекомбинантного штамма E. coli M17fimH::kan/pColap с дефектом в гене адгезина fimH пилей 1-го типа, на фиг. 2 - схема конструирования гибридной плазмиды pColap, на фиг. 3 приведены результаты исследования адгезивной активности сконструированного штамма Escherichia coli М17 fimH::kan/pColap, на фиг. 4 - результаты исследования стабильности сконструированного штамма Escherichia coli М17 fimH::kan/pColap. При получении штамма Е.coli М17 fimH::kan/pColap в качестве исходного использовали его ближайший аналог - штамм Е.coli М17. Для элиминации фимбриального адгезина, сообщающего клеткам Е.coli М17 нежелательный высокоадгезивный М н фенотип, получали рекомбинантный штамм, у которого в хромосомный ген fimH, кодирующий адгезин, был интегрирован ген устойчивости к канамицину-неомицину npt. С этой целью использовали плазмиду pCH103, производную плазмиды R6K, которая имеет pir-зависимую систему репликации и может поддерживаться только в штаммах, содержащих ген pir, обеспечивающий ее репликацию [Сокуренко Е.В., Чеснокова В.Л. "Способ модификации адгезивного фенотипа диких изолятов Е.coli в применении к штаммам - продуцентам препарата колибактерин". Бюллетень экспериментальной биологии и медицины, 1997, Том 124, N 9, с. 334 - 338]. Плазмида pCH103 несет ген устойчивости к ампициллину и фрагмент хромосомы, содержащий гены fim-кластера, в котором целостность гена fimH нарушена вставкой гена устойчивости к канамицину (неомицину) npt. После трансформации ее в штамм Е.coli М17 она не может поддерживаться в клетках, и устойчивые к канамицину трансформанты могут возникать или при интеграции ее целиком в хромосому в результате одного кроссинговера или в результате двойного кроссинговера (фиг. 1). Трансформанты второго класса остаются чувствительными к ампициллину. Среди них был отобран штамм, обозначенный Е.coli M17fimH::kan (или М17 fimH::npt). Проведенное исследование подтвердило отсутствие у полученного штамма маннозо-чувствительной адгезии, т.е. FimH - фенотип. Для повышения антагонистической активности штамма Е. coli М17 и придания ему устойчивости к ампициллину на основе плазмиды ColE1 известными методами ["Методы молекулярной генетики и генной инженерии", 1990, Новосибирск, "Наука", Сибирское отделение, с. 7-10, 39-44] была сконструирована гибридная плазмида pColap (фиг. 1). Исходная плазмида ColE1, выделенная из непатогенного штамма Е.coli, детально изучена. Она имеет довольно узкий круг хозяев (в основном - штаммы кишечной палочки) и стабильно поддерживается в бактериальных клетках. Известны ее полная нуклеотидная последовательность, функции всех ее генетических элементов, регуляция их активности. Плазмида детерминирует синтез колицина E1, который губительно действует на клетки родственных бактерий. Недостатком плазмиды ColE1 является ее способность к мобилизации в другие клетки с помощью конъюгативных плазмид, которая обусловлена присутствием в ее структуре mob-области. Используя эндонуклеазу рестрикции BspLu11.1, эту область полностью удалили и при этом практически не затронули другие генетические элементы плазмиды. Затем, используя эндонуклеазу рестрикции BspH1, из известного вектора pUC19 вырезали фрагмент, содержащий ген b1a, кодирующий синтез - лактамазы, и лигировали его с фрагментом плазмиды ColE1, лишенным mob-области. В результате получили плазмиду pColap. Эта плазмида неконъюгативна и немобилизуема и, следовательно, практически не может быть передана в клетки других бактерий. В отличие от вектора pUC19 и других плазмид pColap обеспечивает только умеренный уровень устойчивости к ампициллину трансформированным ею штаммам Е.coli (табл. 1). Такое ухудшение экспрессии гена - лактамазы наблюдается из-за нарушений в промоторной области гена (боксе Гильберта) и 5" - участке, повышающем эффективность экспрессии , произошедших в результате генетических манипуляций в процессе конструирования рекомбинантной плазмиды pColap. Чувствительность штаммов, несущих pColap, к повышенным концентрациям антибиотика следует считать благоприятным фактором. Так, если по каким-либо причинам присутствие штаммов, содержащих эту плазмиду, в кишечнике пациента становится нежелательным или если в результате какого-либо исключительного события плазмида переносится в другой штамм, то все клетки, содержащие ее, можно элиминировать из организма, применив высокие концентрации -лактамных антибиотиков. Плазмидой pColap трансформировали штамм Е. coli М17 fimH::kan и получили штамм Е.coli М17 fimH::kan/pColap. Штамм имеет следующие характеристики. Морфология. Грамотрицательные слабоподвижные тонкие палочки с закругленными концами 1,5 - 2 мкм в длину. Культурально-физиологические признаки. Мясо-пептонный агар и агаризованный бульон Хотингера. Через 36 ч роста при 37 o C образует круглые беловатые полупрозрачные колонии диаметром 1,5 - 2,5 мм, поверхность колоний гладкая, края ровные, структура однородная, консистенция пастообразная, легко эмульгируются. Агаризованная минимальная среда М9 с глюкозой (0,2%). Через 40 ч роста образует колонии 1-2 мм в диаметре, серовато-беловатые, полупрозрачные, круглые, выпуклые, с ровными краями. Мясо-пептонный бульон и бульон Хотингера. Через 18-24 ч роста при 37 o C наблюдается сильное равномерное помутнение, небольшой осадок, характерный запах. Жидкая минимальная среда М9 с глюкозой (0,2 %). Через 20-24 ч роста с аэрацией наблюдается сильное равномерное помутнение, запах слабый или отсутствует. Рост по уколу в мясо-пептонном агаре. Хороший рост по всему уколу. Микроорганизм является факультативным анаэробом. Отношение к температуре и pH среды. Хорошо растет при температуре от 30 до 42 o C и при pH 6,8 - 7,2. Биохимические свойства. Хорошо усваивает глюкозу, сахарозу, лактозу, фруктозу, маннозу, ксилозу, маннит и сорбит с образованием кислоты и газа. Рамнозу, галактозу и арабинозу - со слабым кислотообразованием; салицин - с замедленным кислото- и газообразованием; рафинозу - только с кислотообразованием. Инозит не усваивает. Сероводород не образует; индол вырабатывает. Отношение к антибиотикам. Устойчив к ампициллину при концентрациях в среде до 150 мг/л. Продукция бактериоцинов. Продуцирует колицин E1. Содержание плазмид. Клетки содержат многокопийную неконъюгативную и немобилизуемую плазмиду pColap (5239 п.н.), детерминирующую устойчивость к ампициллину и синтез колицина E1. Штамм имеет антигенную формулу О2:L1:H6 и агглютинируется сывороткой при титре сыворотки не ниже 1:64000. Изобретение иллюстрируется примерами, которые характеризуют устойчивость штаммов, несущих различные плазмиды, к ампициллину, стабильность их признаков в процессе культивирования. Пример 1. Изучение роста штамма Е. coli М17 и его производных, содержащих плазмиды, на средах с разными концентрациями ампициллина (табл. 1). Исследуемые штаммы кишечной палочки (таблица 1) выращивались в течение 18 ч в бульоне Луриа (LB - 10 г триптона, 5 г дрожжевого экстракта, 5 г NaCl на 1 л дистиллированной воды) при 37 o C с аэрацией. Затем готовили последовательные разведения бактериальных культур до 10 -7 в физиологическом растворе и высевали каждую культуру на чашки с LA (LB + 1,6 % агар), содержащие ампициллин в следующих концентрациях (мкг/мл): 5, 50, 75, 100, 125, 150, 200, 250. Оценку роста колоний производили через 18-24 ч. Результаты представлены в таблице 1. Как видно из таблицы 1, исходный штамм кишечной палочки М17 проявляет высокую чувствительность к ампициллину. Плазмида pUC19, содержащаяся в штамме М17/pUC19, которая явилась источником гена - лактамазы для сконструированной нами плазмиды pColap, придает бактериальной клетке устойчивость к концентрациям ампициллина до 2 г/л. В то же время плазмида pColap, содержащаяся в штамме М17 fimH::kan/pColap, обеспечивает устойчивость к концентрациям ампициллина не выше 150 мг/л. Таким образом, полученные штаммы обладают умеренным уровнем устойчивости к ампициллину. Пример 2. Исследование адгезивных свойств и определение адгезивного фенотипа штамма Е. coli М17 и его производных. Адгезивный фенотип определяли стандартным методом "исследования роста" . Из свежей культуры исследуемых штаммов бактерий готовили суспензию бактериальных клеток в физиологическом растворе с оптической плотностью 1.0 при длине волны 540 нм. Параллельно приготовили планшеты для микротитрования с плоскодонными лунками с иммобилизованными в лунках субстратами для адгезии, а именно: МН (дрожжевой маннан), РН (бычья РНКаза В) и БСА (бычий сывороточный альбумин). Затем бактериальную суспензию помещали в лунки и инкубировали в течение 40 мин. Несвязавшиеся бактериальные клетки тщательно отмывали физиологическим раствором. В лунки добавляли богатую питательную среду и инкубировали с постоянным перемешиванием при 37 o C в течение 2,5 - 3 ч до появления помутнения в лунках. Оптическая плотность в каждой лунке учитывалась на автоматическом ридере микропланшет (Molecular Devices, Inc., Menlo Park, Calif., USA). В данном эксперименте исследовались следующие штаммы Е.coli: М17 - исходный штамм; М17 fimH::kan - штамм М17 с инактивированным геном адгезина fimH: М17 fimH: : kan/pPKL91 - штамм fimH::kan, трансформированный плазмидой pPKL91, содержащей регуляторный ген fimB, включающий экспрессию пилей 1-го типа бактериальной клеткой; штамм M17fimH::kan/pColap - штамм М17 fimH::kan, трансформированный сконструированной нами плазмидой pColap, несущей детерминанты устойчивости к ампициллину и продукции колицина Е1. Результаты исследования адгезивной активности штаммов Е.coli М17 и производных штамма Е.coli М17, оцененной с помощью метода "исследования роста", представлены на фиг. 3 (по оси ординат отложены значения оптической плотности при длине волны 540 нм; на оси абсцисс - исследуемые штаммы Е. coli: 1 - М17; 2 - М17 fimH::kan, 3 - M17fimH::kan/pPKL91, 4 - М17 fimH::kan/pColap). Как видно из фиг. 3, исходный штамм Е. coli М17 хорошо связывается и с РНКазой B, и с маннаном, что указывает на МН адгезивный фенотип, нежелательный для интестинального штамма кишечной палочки. Полученный нами рекомбинантный штамм М17 fimH::kan проявляет нулевую адгезивную активность как сам по себе, так и после введения в него плазмиды, включающей экспрессию пилей 1-го типа. Нулевая адгезиная активность сохраняется в этом штамме и после введения в него плазмиды pColap (штамм М17 fimH::kan/pColap). Пример 3. Исследование стабильности признаков штамма Escherichia coli М17 fimH::kan/pColap, детерминируемых плазмидой pColap. Сконструированная нами плазмида pColap обеспечивает продукцию колицина Е1 и устойчивость к ампициллину. Сохранение этих признаков зависит от стабильности поддержания плазмиды в клетках бактерий: утрата плазмиды сопровождается утратой соответствующих признаков. Определяли стабильность сохранения устойчивости к ампициллину и колициногенности полученных штаммов при культивировании их в жидкой питательной среде в отсутствие селективного агента на протяжении 100 генераций. В качестве положительного контроля использовали исходную плазмиду ColE1, а отрицательного - плазмиду pBR322, производную ColE1, не содержащую локуса cer, который влияет на стабильность плазмид. Культуры штаммов М17 fimH::kan/pColap, М17/ColЕ1 и M17/pBR322 выращивались в течение 18 ч с усиленной аэрацией при 37 o C в LB с ампициллином (100 мкг/мл). Штамм М17/ColЕ1 выращивали в тех же условиях, но без ампициллина. Полученные культуры содержали примерно 10 o бактериальных клеток в 1 мл. Затем в пробирки с 10 мл LB (без добавленного антибиотика) вносили 10 мкл (10 6) соответствующей бактериальной культуры. Полученную суспензию выращивали, как описано выше. При таком культивировании бактериальные клетки успевали пройти 10 делений. Повторив эту операцию 10 раз, мы получили бактериальную культуру, прошедшую 100 генераций с момента первого засева в среду без селективного агента. Перед каждым засевом отбирались пробы бактериальной культуры и проверялись на наличие свойств устойчивости к ампициллину и продукции колицина. Для этого суспензии клеток рассевались на чашках с LA до получения отдельных колоний. Затем по 100 колоний каждого штамма проверялись на способность к росту на той же среде в присутствии ампициллина (100 мкг/мл). Кроме того, колонии проверялись на способность продуцировать колицин Е1. Для этого использовался тест с нанесением верхнего агара (Миллер Дж. "Эксперименты в молекулярной генетике", М. , "Мир", 1976, стр. 183-189). Тест заключается в следующем: на чашки с твердой питательной средой, содержащей 1,6 % агар, репликатором или зубочисткой перекалывают исследуемые колонии. Чашки инкубируют при 37 o C в течение 3 - 4 ч, индуцируют продукцию колицина облучением ультрафиолетом в течение 4-5 с и инкубируют в тех же условиях в течение ночи. Затем клетки лизируют парами хлороформа при комнатной температуре в течение 30 - 40 мин. Важно проследить, чтобы на следующем этапе весь хлороформ выветрился из чашки. Наслаивают на нижний слой агара 3 - 5 мл полужидкого (0,7 %) агара, содержащего 10 7 /мл бактериальных клеток тест-штамма Е. coli (чувствительного к колицину Е1). Инкубируют ночь при 37 o C. Регистрируют наличие зон просветления в слое тест-культуры вокруг пятен исследуемых штаммов. Результаты исследования стабильности сконструированного штамма Escherichia coli М17/pColap приведены на фиг. 2 (ColE1 соответствует штамму М17/ColЕ1, pBR322 - штамму M17/pBR322, pColap - штамму М17/pColap). Присутствие плазмиды в бактериальной клетке следует из сохранения ею исходных свойств (колициногенности и/или устойчивости к ампициллину). Результаты эксперимента (фиг. 2) свидетельствуют, что лишенная cer локуса плазмида pBR322 быстро элиминируется из бактериальной популяции при выращивании в среде, лишенной антибиотика, в то время как две другие плазмиды (исходная ColE1 и рекомбинантная pColap) стабильно наследуются клетками в этих условиях. Это свойство является одним из важным преимуществ нашей конструкции, поскольку, с одной стороны, облегчает получение стандартного препарата на основе штамма, содержащего pColap, а с другой стороны, гарантирует, что при приеме препарата пациентом без сопутствующей антибиотикотерапии не произойдет элиминация плазмиды. Промышленная применимость. Приведенное описание способа конструирования патентуемого штамма Escherichia coli М17 rimH::kan/pColap достаточно для повторного получения штамма с использованием стандартных методик, реагентов и оборудования, применяемых в генно-инженерных исследованиях.

Формула изобретения

Штамм бактерий Escherichia coli M 17 fim H::kan/p Colap ВКПМ В-7448, используемый для получения пробиотического препарата.

Похожие патенты:

Изобретение относится к биотехнологии, в частности к генетической инженерии и медицине, конкретно к медицинской вирусологии и иммунологии, и может быть использовано для проведения иммунодиагностики геморрагической лихорадки Марбург, а также для получения специфических антител к вирусу Марбург и генно-инженерных вакцин против вируса Марбург

Кишечной палочкой (Escherichia coli) учёные называют палочковидную условно-патогенную бактерию, которая способна нормально функционировать и размножаться только в условиях отсутствия кислорода. Была открыта в восемнадцатом веке Теодором Эшерихом, благодаря которому и получила своё название.

Бактерия имеет довольно много штаммов (разновидностей) и большинство из них считаются безвредными (они живут в кишечнике человека, участвуют в синтезировании витаминоподобных соединений, обладают бактерицидными свойствами по отношению к некоторым патогенным микроорганизмам), но встречаются и такие, которые могут вызывать развитие серьёзных проблем со здоровьем, начиная с нарушений работы ЖКТ и заканчивая развитием , поэтому лечение кишечной палочки должно быть качественным и своевременным.

Общие сведения

Безопасные штаммы этого микроорганизма обитают в кишечнике человека, при этом их количество варьирует от 10 6 до 10 8 КОЕ (микробиологический показатель – колониеобразующая единица) на один грамм содержимого кишечника. Сразу стоит рассказать о том, что бактерии заселяют организм человека в первые дни после рождения, поэтому кишечные палочки у грудничков появляются сразу, и в том случае если их количество не превышает норму, они приносят кишечнику пользу, а значит, лечить такое состояние не нужно.

Однако стоит помнить, что некоторые штаммы этого микроорганизма токсичны, особенно для детей и беременных женщин (кишечная палочка в моче при беременности может свидетельствовать о развитии острого или хронического инфекционного заболевания, угрожающего здоровью плода), так что очень важно вовремя диагностировать это состояние и назначить адекватное лечение.

Кишечные палочки бывают условно-патогенные (к которым относится гемолизирующая кишечная палочка) и патогенные. Учёные смогли выделить больше сотни патогенных штаммов этой бактерии, которые впоследствии были разделены на четыре основных класса, а именно:

• энтероинвазивные;
• энтеротоксигенные;
• энтеропатогенные;
• энтерогеморрагические.

Эти микроорганизмы могут стать причиной развития эшерихиозов – заболеваний инфекционного характера, которые по статистике чаще всего встречаются у детей и женщин (инфекция передаётся фекально-оральным путём в основном через пищу или воду).

Симптомы

Симптомы заражения кишечной палочкой проявляются по-разному, поэтому каждый класс патогенных бактерий необходимо рассматривать в отдельности. Состояние здоровья заражённого человека будет зависеть от того, в какую группу относятся и с какой скоростью размножаются кишечные палочки, симптомы заболеваний описаны ниже.

Энтеропатогенные бактерии

Энтеропатогенные микроорганизмы чаще всего встречаются у детей до одного года жизни и их присутствие, как правило, обнаруживается ещё в роддоме. Сопровождаются водянистой диареей, иногда рвотой, отказом от еды и беспокойным сном.

Энтеротоксигенные бактерии

Энтеротоксигенные кишечные палочки опасны тем, что могут прикрепляться именно к слизистой оболочке кишечника, чем существенно нарушают его работу. Инфекция передаётся через немытые руки или фрукты, поэтому симптомы жизнедеятельности кишечных бактерий в человеческом организме иногда называют «диареей путешественника», которая сопровождается водянистым поносом без крови, тошнотой, приступообразной болью в животе.

Энтерогеморрагические бактерии

Энтерогеморрагические эшерихиозы характеризуется диареей с примесью крови и сопровождаются развитием острой гемолитической анемии. Опасность заболевания состоит в том, что гемолитическая кишечная палочка разрушает кровяные тельца, а это может привести к летальному исходу (чаще всего болезнь поражает женщин). Характерным признаком заболевания является то, что в каловых массах обнаруживается большое количество слизи и примесей зеленоватого оттенка, при этом гемолизирующая кишечная палочка не вызывает повышения температуры тела.

Энтероинвазивные бактерии

Энтероинвазивные патогенные микроорганизмы вызывают боли внизу живота и обильный стул (иногда с примесью крови). Встречаются в основном у детей, временно нарушают работу иммунной системы. Следует сказать о том, что чёткой клинической картины эшерихиозов не существуют, пациенты жалуются на боли в животе (которые могут быть локализованы в любой его части), жидкий стул и рвотные позывы, следовательно, лечение кишечных палочек должно быть комплексным и обязательно проходить под контролем врача. Кстати говоря, лактозонегативная кишечная палочка не должна обнаруживаться в кале в слишком больших количествах (норма – 10 5), а увеличение этого показателя можно заметить даже самостоятельно, об этом свидетельствуют непереваренные кусочки пищи в кале и чередование диареи с запорами.

Кишечная палочка, как возбудитель заболеваний мочеполовой системы

В норме кишечная палочка в моче обнаруживаться не должна, но если при сдаче анализов она была там найдена, врач должен в срочном порядке заняться её лечением. Обычно этот микроорганизм обнаруживается врачами-гинекологами при осмотре беременных женщин, причём для многих наличие этого микроорганизма в микрофлоре влагалища становится сюрпризом. Обнаруженная кишечная палочка в мазке свидетельствует о начале развития воспалительного процесса одного или нескольких органов мочеполовой системы (существует вероятность того, что бактерия передаётся половым путём от одного партнёра к другому).

Нужно сказать о том, что кишечная палочка во влагалище, должна стать поводом к тому, чтоб из лаборатории, сразу же отправиться в кабинет к врачу. Дело в том, что она существенно ослабляет местный иммунитет и делает организм больного человека практически беззащитным перед другими опасными бактериями, например, перед протеусом или стафилококком, что в итоге может стать причиной развития или , следовательно, лечить это состояние должен только специалист.

Гемолизирующая кишечная палочка является причиной развития 80% заболеваний мочеполовой системы, к которым относится:

• острый и хронический (кишечная палочка в мазке при диагностике простатита обнаруживается практически в 65% случаев);
• воспаление яичников и у женщин;
• (если кишечная палочка в мазке на вагинит обнаруживается сразу, то лечение этого недуга проходит максимально быстро, а отсутствие адекватной терапии может стать причиной развития серьёзных проблем со здоровьем);
• (очень часто гемолизирующая кишечная палочка обнаруживается при диагностике пиелонефрита у беременных);
• кольпит и так далее.

На самом деле в гинекологии гемолизирующая кишечная палочка занимает особенное место, потому что при попадании во влагалище она провоцирует развитие ряда таких заболеваний, которые впоследствии приводят к бесплодию и трудно поддаются лечению. По этой причине врачи советуют делать профилактику и диагностику этого возбудителя (определяется кишечная палочка в мазке) хотя бы один раз в год.

Как лечить?

Лечить кишечную палочку должен врач, который вначале делает бактериальный посев и точно определяет штамм возбудителя. Интенсивность и длительность лекарственной терапии зависит от вида бактерии, её локализации и индивидуальных особенностей организма больного человека. В процессе лечения важную роль играет диета и приём пробиотиков – препаратов, нормализующих кишечную микрофлору. После окончания курса лекарственной терапии все анализы сдаются повторно.